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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | BC3290 |
| 保存條件 | 2-8℃保存 |
| 英文名稱 | Binding starch synthase (GBSS) test kit |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣 產(chǎn)品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存； 參考價格：3000
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關鍵字: 結合態(tài)淀粉合成酶檢測試劑盒|GBSS檢測試劑盒|結合態(tài)淀粉合成酶|試劑盒
簡要介紹：
GBSS（EC 2.4.1.21）以束縛態(tài)存在于淀粉體中，催化淀粉鏈的加長反應，主要負責直鏈淀粉的合成。
GBSS 催化ADPG 與淀粉引物(葡聚糖)反應,將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上，同時生成ADP；進一步通過反應體系中添加的丙tong酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH，其中NADPH 生成量與前一步反應生成的ADP 數(shù)量呈正比，通過340nm 下測定NADPH 的增加量，可以計算GBSS 活性。
產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體25mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前每支加入7mL試劑一。
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；
試劑四：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前每支加入5mL試劑一。
試劑五：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前每支加入8mL試劑一。
試劑六：粉劑×1支，-20℃保存；臨用前加入500μL雙蒸水，充分溶解備用，用不完的試劑4℃保存；
試劑七：液體250μL×1支，-20℃保存；
試劑八：液體12.5μL×1瓶；每支臨用前加入溶解好的4mL試劑四
反應液Ⅰ的配制：臨用前在試劑二中加入7mL試劑一，緩慢加熱，逐漸升溫使其溶解，冷卻后加入試劑三混合溶解。這樣可以分兩批配制并且測定。
產(chǎn)品說明：
GBSS（EC 2.4.1.21）以束縛態(tài)存在于淀粉體中，催化淀粉鏈的加長反應，主要負責直鏈淀粉的合成。
GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應,將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上，同時生成ADP；進一步通過反應體系中添加的丙tong酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH，其中NADPH生成量與前一步反應生成的ADP數(shù)量呈正比，通過340nm下測定NADPH的增加量，可以計算GBSS活性。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液制備
稱取約0.1g組織加入1mL提取液，冰浴中勻漿。10000g ，4℃離心10min，棄上清，在沉淀中加入1mL提取液充分混勻，置冰上待測。
二、測定步驟
| 試劑名稱（μL） | 測定管 |
| 樣本 | 200 |
| 試劑二 | 270 |
| 混勻，30℃保溫20 min，置沸水浴中1 min（蓋緊，防止水分散失），冰浴冷卻 | |
| 試劑三 | 150 |
| 混勻，30℃保溫30 min，置沸水浴中1 min（蓋緊，防止水分散失）， 冰浴冷卻，10000g 常溫離心10min，取上清液 | |
| 上清液 | 450 |
| 試劑四 | 300 |
| 試劑五 | 15 |
| 試劑六 | 15 |
混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和 2min后的吸光度A2，計算ΔA=A2-A1。
注意：試劑二如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混勻。
三、GBSS活性計算
1、按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白在1mL反應體系中每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。
GBSS活性（U/mg prot）＝ΔA×（V反應體系÷1mL）÷T÷ε÷d÷（Cpr×V樣本×V上清÷（V樣本+V試劑二+V試劑三））=432×ΔA÷Cpr。
此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。
