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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | BC0995 |
| 用途 | |
| 英文名稱 | Plant chlorophyll content detection kit |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
| 是否進口 |
植物葉綠素含量檢測試劑盒說明書
微量法
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
英文名稱：Plant chlorophyll content detection kit
關(guān)鍵詞：植物葉綠素|植物葉綠素含量檢測|植物葉綠素含量
貨號：BC0995
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：自備。將無水乙醇：丙tong（V：V）=1:2 混合待用。
試劑一：粉劑×1 瓶，4℃保存。
產(chǎn)品說明：
植物葉綠素廣泛存在于綠色植物組織中，是光合作用的細胞器。其含量與光合作用、營養(yǎng)狀況密切相關(guān)，是反應(yīng)植物生長狀況的重要指標(biāo)。
葉綠素 a 和葉綠素 b 在 645nm 和 663nm 處有*吸收，根據(jù)經(jīng)驗公式可計算得葉綠素 a 和葉綠素 b 以及總?cè)~綠素的含量。
試驗中所需的儀器和試劑：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96 孔板（建議使用非聚苯乙烯材質(zhì)的 96 孔板）、可調(diào)式移液槍、天平、研缽/勻漿器、錫箔紙、蒸餾水、無水乙醇和丙tong。
操作步驟：
一、樣本制備：
1. 取新鮮植物葉片或其它綠色組織，用蒸餾水洗干凈，然后吸干表面水分，去掉中脈，稱取約 0.1g，剪碎放入研缽或勻漿器中。
2. 加入 1mL 蒸餾水，少量試劑一（約 10mg），在黑暗或弱光條件下充分研磨，轉(zhuǎn)入 10mL 試管中。
3. 用提取液沖洗研缽，將所有沖洗液轉(zhuǎn)入 10mL 管中，用提取液定容至 10mL，置于黑暗條件下或者包上錫箔紙浸提 3h，觀察底部組織殘渣顏色接近于白色則提取完全，若組織殘渣未完全變白，繼續(xù)浸提至組織殘渣顏色接近于白色。
二、測定步驟：
1、 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 645nm 和 663nm，分光光度計用提取液調(diào)零。
2、 取上層浸提液 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板中（若使用聚苯乙烯材質(zhì)的 96 孔板，請在 5min內(nèi)盡快測定完成），測定 663nm 和 645nm 處吸光值，分別記為 A663和 A645 。
三、葉綠素的計算：
葉綠素 a 含量（mg/g 鮮重）=（21.2×A663–4.48×A645）×V 提×F÷W÷1000
= 0.01×（21.2×A663–4.48×A645）×F÷W
葉綠素 b 含量（mg/g 鮮重）=（38.2×A645–7.8×A663）×V 提×F÷W÷1000
= 0.01×（38.2×A645–7.8×A663）×F÷W
葉綠素總含量（mg/g 鮮重）=（33.7×A645 +13.4×A663）×V 提×F÷W÷1000
= 0.01×（33.7×A645 +13.4×A663）×F÷W
V 提：提取液體積，10mL；F：稀釋倍數(shù)；W：樣本質(zhì)量，g
注意事項：
1、 葉綠素對光敏感，研磨和提取等操作盡量避光或者在弱光下進行。
2、 一定要浸提至組織殘渣完全變白，否則提取不充分。
3、 用提取液沖洗研缽一定要沖洗至所有的綠色物質(zhì)被轉(zhuǎn)移至 EP 管。
4、 測定時吸光值超過 1，可進行適當(dāng)稀釋；當(dāng)吸光值小于 0.05 時，可以適當(dāng)減少 V 提取的用量，注意計算公式中改變 V 提取數(shù)值。
5、 若使用聚苯乙烯材質(zhì)的 96 孔板進行測定，請在 5min 內(nèi)盡快測定完成。
相關(guān)文獻：
《SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses》 作者:Fu-Yuan Zhu,Mo-Xian Chen,Wai-Lung Chan,Feng Yang,Yuan Tian,Tao Song,Li-Juan Xi,Ying Zhou ,ShiXiao,Jianhua Zhang,Clive Lo 期刊:Journal of Proteomics 影響因子:3.537 PMID:30048775
