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北京索萊寶科技有限公司
產品展廳
NADP-蘋果酸脫氫酶（NADP-MDH活性檢測試劑盒 紫外分光光度法
  • 品牌：Solarbio
  • 產地：北京
  • 貨號：BC1050
  • 發(fā)布日期： 2019-05-20
  • 更新日期： 2025-10-24
產品詳請
產地 北京
品牌 Solarbio
貨號 BC1050
保存條件 2-8℃保存
英文名稱 NADP-malate dehydrogenase (NADP-MDH activity assay kit)
CAS編號
保質期 1年

產品名稱：NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)活性檢測試劑盒

產品英文名： NADP-Malate Dehydrogenase（NAD-MDH）Assay Kit

產品貨號：BC1050         產地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯東U谷85A三樓

產品規(guī)格：50管/48樣          產品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：400
庫存狀態(tài)：現貨                          
關鍵字：NADP-蘋果酸脫氫酶試劑盒|蘋果酸脫氫酶活性檢測| NADP-MDH活性檢測|試劑盒

簡要介紹：
MDH （EC 1.1.1.37）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，線粒體中 MDH 是 TCA 循環(huán)的關鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中 MDH 催化草酰乙酸形成蘋果酸。草 酰乙酸是重要的中間產物，連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH 在細胞多種生理活動中扮演著 重要的角色，包括線粒體的能量代謝、蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統、活性氧代謝和抗病性等。根據不 同的輔酶特異性，MDH 分為 NAD-依賴的 MDH 和 NADP-依賴的 MDH， NADP-MDH 主要存在于 真核細胞中。 NADP-MDH 催化 NADPH 還原草酰乙酸生成蘋果酸，導致 340nm 處光吸收下降。
產品詳細描述
商品貨號：商品品牌：規(guī)格基本售價：選擇規(guī)格
BC1050-50管/48樣Solarbio 50管/48樣400.00元

產品內容
提取液：提取液 50 mL×1 瓶，在 4℃保存；
試劑一：液體 40 mL×1 瓶，在 4℃保存；
試劑二：粉劑×2 支，-20℃保存；臨用前加入 250μL 雙蒸水，用不完的試劑仍-20℃保存； 試劑三：粉劑×2 支，-20℃保存；臨用前加入 300μL 雙蒸水，用不完的試劑仍-20℃保存。

產品說明
MDH （EC 1.1.1.37）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，線粒體中 MDH 是 TCA 循環(huán)的關鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中 MDH 催化草酰乙酸形成蘋果酸。草 酰乙酸是重要的中間產物，連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH 在細胞多種生理活動中扮演著 重要的角色，包括線粒體的能量代謝、蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統、活性氧代謝和抗病性等。根據不 同的輔酶特異性，MDH 分為 NAD-依賴的 MDH 和 NADP-依賴的 MDH， NADP-MDH 主要存在于 真核細胞中。 NADP-MDH 催化 NADPH 還原草酰乙酸生成蘋果酸，導致 340nm 處光吸收下降。
自備儀器和試劑 紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調節(jié)移液器、1mL 石英比色皿和蒸餾水

操作步驟

  • 粗酶液提?。?/span>

細菌或培養(yǎng)細胞：收集細菌或細胞到離心管內，棄上清，按照每 200 萬細菌或細胞加入 400μL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（功率 20％，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次），8000g 4℃離心 10min， 取上清，置冰上待測。 組織：稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿；8000g 4℃離心 10min，取上清，置 冰上待測。 血清（漿）樣品：直接檢測。
二、測定步驟：
1、分光光度計預熱 30min 以上，調節(jié)波長至 340nm，蒸餾水調零。
2、試劑一置于 37℃水浴中預熱 30min 以上（保證無沉淀）。
3、操作表：
 
試劑名稱（μL）測定管空白管
樣本20
蒸餾水
20
試劑一760760
試劑二1010
試劑三1010
將上述試劑按順序加入 1 mL 石英比色皿中，充分吹打混勻后立即記錄 340nm 波長下初始吸 光度 A1 和反應 1min 后的吸光度 A2，計算 ΔA 空白=A1 空白-A2 空白，ΔA 測定=A1 測定-A2 測定，計算 ΔA=ΔA 測定-ΔA 空白。

三、NADP-MDH 活力單位的計算： 
1、血清（漿）NADP-MDH 活力的計算
單位的定義：每毫升血清（漿）在反應體系中每分鐘消耗 1 nmol 的 NADPH 定義為一個酶活力單位。
NADP-MDH（U/mL）=ΔA÷ε÷d×V 反總÷V 樣÷T×109 =6430×ΔA ε：NADPH 消光系數，6.22×103 L/ mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V 反總：反應總體積，0.0008L； V 樣：加入樣品體積，0.02mL；T：反應時間，1min。
2、組織中 NADP-MDH 活力的計算:
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每 mg 組織蛋白在反應體系中每分鐘消耗 1nmol 的 NADPH 定義為一個酶活力單位。
NADP-MDH（U/mg prot）=ΔA÷ε÷d×V 反總÷（Cpr×V 樣）÷T×109 = 6430× ΔA ÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每 g 組織在反應體系中每分鐘消耗 1nmol 的 NADPH 定義為一個酶活力單位。
NADP-MDH（U/g 鮮重）=ΔA÷ε÷d×V 反總÷（W×V 樣÷V 提?。耇×109 = 6430 × ΔA ÷W ε：NADPH 消光系數，6.22×103 L/ mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V 反總：反應總體積，0.0008L； V 樣：加入樣品體積，0.02mL；V 提?。禾崛∫后w積，1mL；W：樣本鮮重，g；Cpr :樣本蛋白濃度， mg/ml；T：反應時間，1min。
3 細菌或培養(yǎng)細胞中 NADP-MDH 活力的計算:
單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞在反應體系中每分鐘消耗 1nmol 的 NADPH 定義為一個酶活力單 位。
NADP-MDH（U/104 cell）=ΔA÷ε÷d×V 反總÷（200×V 樣÷V 提?。耇×109 =13 × ΔA ÷W ε：NADPH 消光系數，6.22×103 L/ mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V 反總：反應總體積，0.0008L； V 樣：加入樣品體積，0.02mL；V 提取：細胞提取液體積，0.4mL；200：200 萬細胞；T：反應時 間，1min。

注意事項
 1、粗酶液的提取必須在 0℃ - 4℃中操做完成，以防止酶變性失活。
 2、實驗時，試劑二、試劑三和樣本在冰上放置，以免變性和失活。試劑一 37℃放置。
 3、建議一人加樣一人比色。盡量保持反應溫度為 37℃。
 4、空白管測 1-2 管即可。
聯系方式
手機：17801761073微信同號
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