還在為堿性蛋白(pI>7)
天然構(gòu)象易丟失、條帶模糊而發(fā)愁?
傳統(tǒng)Tris-Gly系統(tǒng)讓堿性蛋白“寸步難行”?
索萊寶新推出
堿性蛋白Native PAGE凝膠制備及電泳試劑盒
為您的實驗排憂解難!
產(chǎn)品介紹
各種蛋白質(zhì)分子由于所含的堿性氨基酸和酸性氨基酸的數(shù)目不同,因而有各自的等電點。凡堿性氨基酸含量較多的蛋白質(zhì)稱為堿性蛋白質(zhì),等電點偏堿性,pI>7.0,如組蛋白、精蛋白等。反之,凡酸性氨基酸含量較多的蛋白質(zhì),等電點就偏酸性,pI< 7.0。分離堿性蛋白時,要利用低pH凝膠系統(tǒng),分離酸性蛋白時,要利用高pH凝膠系統(tǒng)。酸性蛋白通常在非變性凝膠電泳中采用的pH是8.8的緩沖系統(tǒng),蛋白會帶負電荷,蛋白會向陽極移動;而堿性蛋白通常電泳是在微酸性環(huán)境下進行,蛋白帶正電荷,會向陰極移動,這時候需要將陰極和陽極倒置才可以電泳(即紅→陰極(黑),黑→陽極(紅))。
本試劑盒不適用于總蛋白樣品的電泳,也不適用于總蛋白分離后的Western Blot檢測;推薦應(yīng)用于純化后蛋白的堿性蛋白電泳。
產(chǎn)品組成
產(chǎn)品應(yīng)用
① 可用于堿性蛋白活性顯色檢測:
可直接定位凝膠中具有特定功能的堿性蛋白條帶。
② 可用于蛋白回收鑒定與功能驗證:
進一步明確凝膠中目標堿性蛋白或進行體外功能驗證。
③ 可用于分析復(fù)合物的組成及分子量鑒定:
非變性凝膠可以保留蛋白復(fù)合物,可以通過考馬斯亮藍染色來進行半定量分析。
結(jié)果示例
產(chǎn)品亮點
① 零變性環(huán)境:
本試劑盒無SDS和還原劑,樣品無需加熱制樣,保留蛋白的活性和天然構(gòu)象。
② 條帶清晰銳利:
本試劑盒在非變性條件下,可通過分子篩效應(yīng)實現(xiàn)堿性蛋白的高分辨分離,條帶銳利、拖尾少。
③ 配備全過程試劑:
本試劑盒包含堿性蛋白凝膠和樣品制備以及后續(xù)電泳所需的全部試劑,可用于配制30-50塊1.5mm厚度常規(guī)大小的Native-PAGE凝膠,用戶只需自備制膠器具和蒸餾水。
常見FAQs
只能跑堿性蛋白嗎?中性/酸性能不能跑?
推薦pI≥7,部分中性也能跑,但酸性蛋白(pI<5)建議使用常規(guī)pH8.8體系。
一盒能配多少塊膠,能加多少樣品?
標配30-50塊1.5mm厚度凝膠,可加約300-500個樣品。
電泳條件怎么設(shè)計?
參考電壓為S1:100V,15min;S2:150V,1h,也可以嘗試150V恒溫電壓45-65min。
怎么檢測電泳分離效果?
可以用溶菌酶或者BSA樣品做陽性對照檢測電泳分離效果。
產(chǎn)品推薦
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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G4846 |
5×堿性蛋白電泳緩沖液 (非變性電泳) |
500mL |
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G4847 |
5×堿性蛋白電泳緩沖液 (非變性電泳,粉劑) |
1L/10*1L |
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G4848 |
5×甲基綠堿性蛋白上樣緩沖液 |
10mL |